7500定量PCR儀是特異性靶基因檢測與定量的一體化平臺。7500將PCR熱循環,熒光檢測和各種應用分析軟件結合在一起,可以動態觀察PCR每一循環各反應管中PCR擴增產物逐漸增加的情況。PCR實驗結束后可以馬上得到定量結果,無需凝膠電泳分析,無需純化PCR產物,無需進行任何實驗操作。7500型實時熒光定量PCR儀采用96孔反應板或單個及8聯管,反應體積25-100微升,實驗可以在不到2小時內結束。與其他人工基因定量分析方法如Northern blotting or RNase-protection assays相比,7500型實時熒光定量PCR系統具有時間省,靈敏度高,準確性好和線性范圍寬等優點。
是指在PCR反應體系中加入熒光基因,利用熒光信號累積實時監測整個PCR進程,后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。在7500定量PCR儀技術的發展過程中,兩個重要的發現起著關鍵的作用:
在90年代早期,TaqDNA多聚酶的5′核酸外切酶活性的發現,它能降解特異性熒光記探針,因此使得間接的檢測PCR產物成為可能。
第二此后熒光雙標記探針的運用使在一密閉的反應管中能實時地監測反應全過程。這兩個發現的結合以及相應的儀器和試劑的商品化發展導致7500定量PCR儀方法在研究工作中的運用。
7500定量PCR儀
7500定量PCR儀系統的特色:
1、擴增反應曲線的實時監測。
2、采用標準曲線進行靶基因的定量。
3、光源使用時間監測及儀器系統自我診斷程序。
4、反應板設置指南,使實驗設計非常簡單,即使是復雜的多重定量實驗也是如此。
5、自動設定熒光基線,自動計算熒光閾值使實驗結果分析大大簡化。
6、自動SNP分型軟件以直觀的圖表輸出分型結果并自動進行分型質量評分。
7、解離曲線數據采集操作簡單觀察方便,可以在儀器運行時觀察解離曲線數據。
8、觀察實時擴增曲線時可以非常方便的標定所對應的樣品孔位置。
9、基因表達相對定量軟件提供強大的結果分析顯示,可以自動將多達10塊96孔板基因表達實驗的數據同時分析,并自動去除無關項數據,該軟件為選購件。